什麽是微(wei)生物限度檢測(ce)儀？儀器(qi)和操(cao)作方法(fa)介(jie)紹

        微生物限度檢測(ce)是壹(yi)種(zhong)在生物制(zhi)藥、醫療器(qi)械(xie)、化(hua)妝(zhuang)品企(qi)業(ye)、食(shi)品(pin)飲料、醫(yi)療疾控、第三方檢(jian)測(ce)、檢驗檢疫等(deng)單位(wei)機(ji)構(gou)中廣(guang)泛(fan)進(jin)行(xing)的，主要(yao)是用(yong)來(lai)評(ping)估(gu)藥品、食(shi)品(pin)飲料、生物制(zhi)劑(ji)、化妝(zhuang)品、醫(yi)療器(qi)械(xie)等(deng)產品(pin)中(zhong)微(wei)生物汙(wu)染(ran)程度的質(zhi)量控(kong)制(zhi)方法(fa)。可以(yi)檢(jian)測(ce)樣品中需(xu)氧菌(jun)、黴菌、酵母菌(jun)總數(shu)，以(yi)及(ji)特定(ding)致病(bing)菌——如(ru)大腸桿(gan)菌、沙(sha)門氏(shi)菌、金黃(huang)色葡萄球(qiu)菌(jun)等(deng)特定(ding)病(bing)原微(wei)生物的存(cun)在，目(mu)的是確(que)保(bao)產(chan)品(pin)中(zhong)的微(wei)生物數(shu)量在安(an)全範(fan)圍內，避免(mian)對消費(fei)者和(he)使(shi)用(yong)者健康(kang)造成危害。更(geng)具(ju)體的來(lai)講(jiang)，在制(zhi)藥行(xing)業(ye)，能(neng)確(que)保(bao)無菌或(huo)微生物限度，符合(he)中國藥(yao)典(dian)、美國FDA等(deng)各國(guo)藥(yao)品(pin)監(jian)督(du)的要(yao)求；在食(shi)品(pin)飲料生產(chan)時(shi)，保障(zhang)出廠的產(chan)品(pin)安(an)全，防(fang)止微(wei)生物汙(wu)染(ran)印發(fa)的健康(kang)風險；在化(hua)妝(zhuang)品企(qi)業(ye)，確(que)保(bao)產(chan)品(pin)微(wei)生物指標符(fu)合(he)衛生標準規(gui)範。

        進(jin)行(xing)微(wei)生物限度檢測(ce)的主要(yao)幾種(zhong)方法(fa)有(you)以(yi)下(xia)幾種(zhong)：平皿(min)計數(shu)法，直(zhi)接(jie)通(tong)過培(pei)養(yang)基(ji)培(pei)養(yang)並(bing)計(ji)數(shu)微生物；最可能數(shu)法，是通(tong)過統計(ji)方法(fa)估(gu)算(suan)微生物數(shu)量；快(kuai)速檢(jian)測(ce)法，如(ru)PCR、ATP生物發光(guang)法等(deng)，用(yong)於(yu)快(kuai)速篩(shai)查(zha)；膜(mo)過濾(lv)法，適用(yong)於(yu)液體樣(yang)品(pin)，過濾(lv)後培(pei)養(yang)並(bing)計(ji)數(shu)。

        在上(shang)述(shu)幾種(zhong)方法(fa)中(zhong)，平皿(min)法通(tong)常用(yong)於(yu)不可過濾(lv)的固(gu)體或(huo)高黏(nian)度樣品(pin)，或(huo)者少(shao)量的濾(lv)液（10ml以(yi)下(xia)）；最可能數(shu)法由(you)於(yu)通(tong)過統計(ji)的方法(fa)估(gu)算(suan)的數(shu)值，結(jie)果(guo)準確(que)度低。 目(mu)前(qian)使(shi)用(yong)較(jiao)多的是膜(mo)過濾(lv)法，其在微(wei)生物檢測(ce)中具有顯(xian)著(zhu)優(you)勢。其原理是將(jiang)壹(yi)定(ding)量的待檢測(ce)液體樣(yang)品(pin)，倒入過濾(lv)杯(bei)中(zhong)，使用(yong)真(zhen)空(kong)泵產生的負(fu)壓(ya)吸(xi)引(yin)力(li)，使液體能(neng)通(tong)過濾(lv)膜，微生物被截(jie)留(liu)在膜(mo)上(shang)，然(ran)後將(jiang)濾膜(mo)置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang)培(pei)養(yang)，最(zui)後計數(shu)形成的菌(jun)落(luo)。所(suo)以(yi)濾(lv)膜法能夠富集(ji)樣(yang)品(pin)中的微(wei)生物，即使(shi)微生物濃(nong)度很低（如(ru)1 CFU/100mL），也能(neng)通(tong)過增加(jia)過濾(lv)液體的總容量來(lai)提高檢(jian)測(ce)靈敏度。

      在具(ju)體準備過濾(lv)裝(zhuang)置(zhi)時，應(ying)當註意(yi)過濾(lv)裝(zhuang)置(zhi)的聯(lian)數(shu)，聯數(shu)是指(zhi)單(dan)次可以(yi)同時過濾(lv)的樣(yang)品(pin)數(shu)量。例(li)如(ru)R300B單聯微生物檢測(ce)抽濾裝(zhuang)置(zhi)，采(cai)用(yong)的是常(chang)規(gui)的上(shang)方過濾(lv)漏鬥，連(lian)接(jie)底(di)部(bu)集(ji)液瓶(ping)的結(jie)構(gou)形式，濾(lv)液通(tong)過濾(lv)膜後直接(jie)流入底(di)部(bu)試(shi)劑(ji)瓶(ping)待實(shi)驗結束(shu)後處理，抽(chou)濾瓶(ping)帶有接(jie)口連(lian)接(jie)真(zhen)空(kong)泵來進(jin)行(xing)抽(chou)氣(qi)形成負(fu)壓(ya)吸(xi)引(yin)力(li)。單聯(lian)過濾(lv)裝(zhuang)置(zhi)結構(gou)簡(jian)單，整(zheng)體尺寸(cun)小(xiao)巧(qiao)，占用(yong)空(kong)間(jian)少(shao)，每(mei)次過濾(lv)壹(yi)組(zu)樣(yang)品(pin)，較為適合檢(jian)測(ce)樣品量不大的用(yong)戶(hu)。

       而針對(dui)大型(xing)企(qi)業(ye)，或(huo)者是疾控、第三方檢(jian)測(ce)等(deng)單位(wei)，由(you)於(yu)檢測(ce)樣品數(shu)量多，如(ru)果(guo)每(mei)次只(zhi)能(neng)過濾(lv)壹(yi)組(zu)樣(yang)品(pin)，效率低下(xia)。這時(shi)候(hou)就(jiu)可以(yi)使(shi)用(yong)多聯(lian)過濾(lv)系統，它是通(tong)過壹(yi)組(zu)使(shi)用(yong)金屬材(cai)質制(zhi)作的過濾(lv)支架(jia)，將(jiang)多組(zu)過濾(lv)杯(bei)連(lian)接(jie)起來，使(shi)其可以(yi)通(tong)過同壹(yi)臺真(zhen)空泵來抽(chou)氣(qi)產(chan)生負(fu)壓(ya)吸(xi)力(li)。典型(xing)的如(ru)BV-321-A三聯式和(he)BV-621A六(liu)聯(lian)式微(wei)生物限度檢測(ce)真空抽濾(lv)系(xi)統，可以(yi)同時過濾(lv)3組或(huo)6組樣品(pin)。支(zhi)架(jia)采(cai)用(yong)耐腐(fu)蝕的陽(yang)極(ji)鋁(lv)合金材(cai)質(zhi)制(zhi)作，對應插(cha)入(ru)3或(huo)6支過濾(lv)漏鬥，漏鬥中(zhong)間放(fang)置(zhi)濾膜(mo)。支架(jia)側(ce)邊帶有接(jie)口連(lian)接(jie)壹(yi)個(ge)大容量的集(ji)液瓶(ping)，濾液通(tong)過濾(lv)膜後流入集(ji)液瓶(ping)內暫存(cun)，集液瓶(ping)底部(bu)帶快(kuai)速排(pai)液口，瓶(ping)滿後松(song)開(kai)排液管夾(jia)可以(yi)快(kuai)速導出(chu)濾(lv)液，不需(xu)要(yao)停下(xia)工作打(da)開(kai)集液瓶(ping)蓋的繁(fan)復(fu)操(cao)作。集液瓶(ping)的頂(ding)部(bu)有(you)2個(ge)接(jie)口，壹(yi)個(ge)連(lian)接(jie)支(zhi)架(jia)、另(ling)壹(yi)個(ge)接(jie)抽(chou)濾泵，這樣(yang)即可以(yi)實(shi)現1臺泵搭(da)配1只集(ji)液瓶(ping)，同時處理數(shu)個過濾(lv)漏鬥內的樣(yang)品(pin)，大幅提升過濾(lv)效率。

       在選(xuan)擇(ze)合適的機(ji)型(xing)後，具體進(jin)行(xing)檢(jian)測(ce)大致包含(han)以(yi)下(xia)步驟：

1. 準備濾(lv)膜(mo)：選(xuan)擇(ze)合適的濾(lv)膜(mo)並(bing)滅(mie)菌，也可以(yi)直(zhi)接選(xuan)購已經伽(jia)馬射(she)線（輻照）滅(mie)菌的無菌包裝(zhuang)過濾(lv)膜。濾膜(mo)材(cai)質(zhi)通(tong)常推(tui)薦使(shi)用(yong)MCE混(hun)合纖維素(su)材(cai)料。直(zhi)徑根(gen)據(ju)過濾(lv)裝(zhuang)置(zhi)的漏鬥大小來選(xuan)擇(ze)，壹(yi)般為(wei)47或(huo)50mm較為常(chang)見(jian)。空間(jian)根(gen)據(ju)需要(yao)檢測(ce)的微(wei)生物來覺得，壹(yi)般為(wei)0.22或(huo)0.45微米。推(tui)薦(jian)使用(yong)帶網格(ge)線(xian)的過濾(lv)膜，便於(yu)計數(shu)時的觀察(cha)。

2. 過濾(lv)樣品：將(jiang)液體樣(yang)品(pin)通(tong)過濾(lv)膜過濾(lv)，微生物被截(jie)留(liu)。具(ju)體根(gen)據(ju)選(xuan)擇(ze)的過濾(lv)裝(zhuang)置(zhi)型(xing)號參加(jia)說明(ming)書(shu)操(cao)作。

3. 轉移(yi)濾(lv)膜：將(jiang)濾膜(mo)移(yi)至(zhi)適當的培(pei)養(yang)基(ji)上(shang)。

4. 培(pei)養(yang)：在適宜條(tiao)件(jian)下(xia)培(pei)養(yang)，使(shi)微(wei)生物生長(chang)。

5. 計(ji)數(shu)：培(pei)養(yang)結(jie)束(shu)後，計數(shu)濾膜(mo)上(shang)的菌(jun)落(luo)數(shu)。