關於實驗室96孔(kong)板真(zhen)空(kong)純(chun)化(hua)抽濾(lv)裝置(zhi)的組成、用(yong)途和離(li)心機(ji)上(shang)樣(yang)方(fang)法(fa)的對(dui)比(bi)分(fen)析

       在分(fen)子(zi)生物學、藥(yao)物篩(shai)選(xuan)和臨(lin)床(chuang)診斷等高(gao)通(tong)量研究(jiu)領(ling)域(yu)，96孔(kong)板真(zhen)空(kong)純(chun)化(hua)抽濾(lv)裝置(zhi)已成為(wei)提升(sheng)樣(yang)本(ben)處理(li)效率的關鍵工具(ju)。該裝(zhuang)置(zhi)以(yi)96孔(kong)微孔(kong)過濾(lv)板為(wei)核心，通(tong)過真(zhen)空(kong)負壓(ya)驅動(dong)液體快速(su)穿(chuan)過濾(lv)膜，實現樣(yang)品的高(gao)通(tong)量並行(xing)純(chun)化(hua)。其工作(zuo)流(liu)程極(ji)為(wei)高效——操(cao)作(zuo)人(ren)員(yuan)只需(xu)將(jiang)含(han)有(you)樣(yang)品的96孔(kong)過濾(lv)板置(zhi)於密封(feng)過濾(lv)座上(shang)，啟(qi)動(dong)真(zhen)空(kong)泵(beng)，即可在數分(fen)鐘內(nei)同時(shi)完成(cheng)96個(ge)樣(yang)本(ben)的(de)純(chun)化(hua)，如DNA結(jie)合(he)、雜(za)質清(qing)洗或溶液置(zhi)換(huan)等步(bu)驟(zhou)。

壹、應用(yong)場景(jing)：從(cong)核酸純(chun)化(hua)到(dao)藥(yao)物篩(shai)選(xuan)

        96孔(kong)板真(zhen)空(kong)純(chun)化(hua)抽濾(lv)裝置(zhi)憑(ping)借(jie)其高通(tong)量特性(xing)，已滲(shen)透至(zhi)生命(ming)科學研(yan)究(jiu)的核心環節(jie)：

●核酸純(chun)化(hua)：使用(yong)抽濾(lv)裝置(zhi)搭配(pei)96孔(kong)過濾(lv)板可快速(su)清(qing)除細胞(bao)裂解(jie)後的(de)碎片(pian)，顯(xian)著(zhu)提(ti)升(sheng)質粒DNA得(de)率。實驗數(shu)據顯(xian)示，真(zhen)空(kong)抽濾(lv)的方(fang)法(fa)，相比(bi)傳統(tong)離(li)心法(fa)回收(shou)率高10%-30%，且(qie)96個(ge)樣(yang)本(ben)的(de)處理(li)時(shi)間縮(suo)短至(zhi)10分(fen)鐘內(nei)，大(da)幅降(jiang)低(di)大(da)樣(yang)本(ben)量實驗的(de)時間成本(ben)。

●蛋(dan)白(bai)分(fen)離(li)與濃縮(suo)：使(shi)用(yong)表(biao)面(mian)修(xiu)飾(shi)的聚醚碸膜的(de)過(guo)濾(lv)板，通(tong)過降(jiang)低(di)蛋(dan)白(bai)、核(he)酸吸(xi)附，實現>90%的(de)目(mu)標(biao)生物分(fen)子(zi)回收(shou)率，減少(shao)滯(zhi)留(liu)體積，尤其適(shi)用(yong)於單(dan)克(ke)隆抗(kang)體篩選(xuan)或酶(mei)活(huo)性(xing)研究(jiu)。

●高通(tong)量篩選(xuan)：使用(yong)預裝(zhuang)填(tian)層(ceng)析介質的濾(lv)板，可直接用(yong)於His標(biao)簽(qian)蛋白(bai)的(de)平(ping)行(xing)純(chun)化(hua)。每(mei)孔(kong)可處理(li)1mg蛋(dan)白(bai)，且(qie)支(zhi)持(chi)自(zi)動(dong)化(hua)操(cao)作(zuo)，特別(bie)適(shi)合(he)藥物靶點(dian)結合(he)研究(jiu)或表(biao)達(da)條件(jian)優(you)化(hua)8。

       此(ci)外(wai)，在PCR產(chan)物純(chun)化(hua)、ELISA分(fen)析、細胞(bao)裂解(jie)物澄(cheng)清(qing)等領(ling)域(yu)，該裝(zhuang)置(zhi)也(ye)展現出(chu)強大(da)的兼(jian)容(rong)性(xing)。

二(er)、裝(zhuang)置(zhi)的構造(zao)組(zu)成(cheng)

       典型96孔(kong)板真(zhen)空(kong)純(chun)化(hua)抽濾(lv)裝系(xi)統包含(han)三(san)大(da)組件(jian)：真(zhen)空(kong)抽濾(lv)泵(beng)、陽(yang)極(ji)氧化(hua)鋁材(cai)質的(de)過(guo)濾(lv)座，以(yi)及廢液收(shou)集(ji)瓶。下(xia)面(mian)我(wo)們以(yi)配(pei)置(zhi)較(jiao)為(wei)齊全(quan)的(de)Sciencetool聖(sheng)斯特品牌(pai)R3-W200-SB2型(xing)號為(wei)例，來說(shuo)明這些部(bu)件(jian)的(de)作(zuo)用(yong)。

●真(zhen)空(kong)抽濾(lv)泵(beng)

        裝(zhuang)置(zhi)內(nei)標(biao)配(pei)1臺(tai)R300無(wu)油真(zhen)空(kong)抽濾(lv)，插上(shang)電(dian)源、開(kai)機(ji)即可使用(yong)，易於操(cao)作(zuo)，無(wu)需(xu)使用(yong)經驗(yan)。抽濾(lv)泵(beng)能提(ti)供穩(wen)定(ding)、可控的負壓(ya)吸(xi)引(yin)力(li)（標(biao)配(pei)調(tiao)節(jie)閥(fa)，可控制負壓(ya)吸(xi)力(li)和過(guo)濾(lv)速度(du)）。 這是(shi)整個(ge)裝置(zhi)運(yun)作(zuo)的(de)“心臟(zang)"。 通(tong)過電(dian)機(ji)驅動(dong)，將(jiang)整個(ge)密閉(bi)系統內(nei)的空(kong)氣(qi)持續(xu)抽出，在過(guo)濾(lv)座腔(qiang)室和廢液瓶(ping)內(nei)形(xing)成(cheng)低(di)於大(da)氣(qi)壓的(de)環境。這個(ge)壓差(cha)是(shi)液體穿過(guo)濾(lv)膜進(jin)入(ru)廢液瓶(ping)的(de)根本(ben)動(dong)力(li)。此(ci)外(wai)R300前置(zhi)了1組緩(huan)沖杯組(zu)件(jian)，出(chu)了具(ju)有(you)壹定(ding)防(fang)倒吸(xi)能力(li)外(wai)，還(hai)能起(qi)到(dao)使(shi)負壓(ya)變(bian)得持續(xu)、平(ping)穩(wen)的效果。壓(ya)力(li)波(bo)動過(guo)大(da)會(hui)導(dao)致(zhi)不(bu)同孔(kong)位間的過濾(lv)速度(du)不(bu)壹致(zhi)，影(ying)響(xiang)結(jie)果的(de)均壹性(xing)和回收(shou)率，而(er)且(qie)壓(ya)力(li)過(guo)高可能擠(ji)壓樣(yang)本(ben)或損(sun)壞(huai)濾(lv)膜，壓(ya)力(li)過(guo)低則(ze)過濾(lv)緩(huan)慢甚(shen)至(zhi)停(ting)滯。

●純(chun)化(hua)過濾(lv)座

       提供密封(feng)、適(shi)配(pei)、承壓(ya)的過(guo)濾(lv)平臺(tai)，確(que)保96孔(kong)板各(ge)孔(kong)位在(zai)均勻負壓(ya)下(xia)高(gao)效、獨(du)立(li)地完(wan)成(cheng)過濾(lv)。R3-W200-SB2配(pei)有(you)1臺(tai)陽(yang)極(ji)鋁合(he)金(jin)材(cai)質的(de)過(guo)濾(lv)座，頂部(bu)設計精確(que)匹(pi)配(pei)標(biao)準96孔(kong)微孔(kong)過濾(lv)板的(de)尺寸(cun)和形(xing)狀(zhuang)，確(que)保濾(lv)板能穩(wen)固(gu)放(fang)置。過(guo)濾(lv)板接(jie)觸的頂部(bu)邊(bian)緣裝(zhuang)有(you)高質(zhi)量的橡(xiang)膠密封(feng)圈，當真(zhen)空(kong)泵(beng)工(gong)作(zuo)時(shi)，整個(ge)系統(tong)（濾(lv)板下(xia)方(fang)空(kong)間、過濾(lv)座腔(qiang)體、廢液瓶(ping)）能形(xing)成(cheng)有(you)效密封(feng)的負壓(ya)腔(qiang)室，防(fang)止(zhi)空(kong)氣(qi)泄(xie)漏導(dao)致真(zhen)空(kong)失(shi)效。同(tong)時(shi)使得(de)96個(ge)孔(kong)位下(xia)方(fang)的(de)負壓(ya)環境是(shi)隔(ge)離且(qie)均勻的(de)，防止(zhi)孔(kong)間交叉汙(wu)染和壓(ya)力(li)不(bu)均。陽(yang)極(ji)氧化(hua)鋁材(cai)質因(yin)其高強度(du)、輕量化、優(you)異(yi)的(de)耐(nai)腐蝕性(xing)，尤其耐受(shou)實驗室常(chang)用(yong)消毒劑和緩(huan)沖液，以(yi)及良好(hao)的(de)導熱(re)性(xing)而(er)被廣泛采(cai)用(yong)。陽(yang)極(ji)氧化(hua)表(biao)面(mian)處理(li)進(jin)壹步(bu)增(zeng)強了其硬度(du)和耐(nai)腐蝕(shi)性(xing)。良好(hao)的導(dao)熱(re)性(xing)有助於在需(xu)要溫控(kong)的(de)實驗（如(ru)某些(xie)酶(mei)反(fan)應後過(guo)濾(lv)）中(zhong)保持溫度(du)相對穩(wen)定。

●廢液收(shou)集(ji)瓶

      安全、集(ji)中(zhong)地收(shou)集(ji)和儲(chu)存過濾(lv)過程中(zhong)產(chan)生的(de)所(suo)有廢液。過(guo)濾(lv)座標(biao)配(pei)也(ye)帶(dai)有(you)廢液收(shou)集(ji)槽(cao)，但容(rong)量較小，需(xu)要頻繁清(qing)理(li)。本(ben)型(xing)號標(biao)配(pei)2升(sheng)的真(zhen)空(kong)集(ji)液瓶(ping)，大(da)容量設計是(shi)為(wei)了減少(shao)實驗中(zhong)途(tu)傾倒廢液的(de)頻率，尤其是(shi)在(zai)連(lian)續(xu)處理(li)多(duo)塊96孔(kong)板或進(jin)行大(da)樣(yang)本(ben)量實驗時(shi)，提高(gao)了工作(zuo)效率和連(lian)續(xu)性(xing)。

三、和傳統(tong)離(li)心機(ji)上(shang)樣(yang)的(de)特點(dian)對比(bi)

1.操(cao)作(zuo)便捷(jie)，節(jie)省時間：

        傳統(tong)的(de)離心機(ji)上(shang)樣(yang)，通(tong)過離(li)心力(li)將(jiang)濾(lv)液甩(shuai)過(guo)過濾(lv)耗材(cai)的濾(lv)芯。這個(ge)過程需(xu)要操(cao)作(zuo)人(ren)員(yuan)重(zhong)復(fu)進(jin)行加(jia)註(zhu)試劑、將(jiang)過濾(lv)板或離(li)心柱(zhu)耗(hao)材(cai)放(fang)置到(dao)離(li)心機(ji)上(shang)、等待(dai)離(li)心機(ji)升(sheng)速、離(li)心、等待(dai)降(jiang)速、取出過濾(lv)板或離(li)心柱(zhu)、處理(li)掉(diao)收(shou)集(ji)板或收(shou)集(ji)管(guan)中(zhong)的(de)廢液等壹系(xi)列(lie)繁瑣(suo)步(bu)驟(zhou)。而(er) 96 孔(kong)板真(zhen)空(kong)純(chun)化(hua)抽濾(lv)裝置(zhi)采(cai)用(yong)負壓(ya)過(guo)濾(lv)方(fang)式，以(yi)常見(jian)的(de) 96 孔(kong)板為(wei)例，加註(zhu)試劑後，試劑能在(zai)短時間內(nei)（壹般(ban) 5 秒(miao)左右）被快速(su)抽走，順(shun)著(zhe)管(guan)路流(liu)入(ru)集(ji)液瓶(ping)內(nei)保存。整個(ge)過程可以(yi)實現連(lian)續(xu)加(jia)註(zhu)試劑，只需(xu)在試驗全部(bu)完成(cheng)或者(zhe)集液瓶(ping)即將(jiang)裝滿(man)時，壹次(ci)性(xing)處理(li)廢液，大(da)大(da)節(jie)省了操(cao)作(zuo)時(shi)間，提高了工作(zuo)效率。

2.設備兼(jian)容(rong)性(xing)強，降(jiang)低成本(ben)：

        使(shi)用(yong)離心機(ji)進(jin)行過(guo)濾(lv)時，針(zhen)對不同(tong)的多(duo)孔(kong)板和過(guo)濾(lv)柱(zhu)，往往需(xu)要更換(huan)不(bu)同的(de)轉子及適(shi)配(pei)器(qi)。部(bu)分(fen)小容(rong)量的離(li)心機(ji)甚(shen)至(zhi)無法(fa)適(shi)配(pei)酶(mei)標(biao)板轉(zhuan)子(zi)，這就需(xu)要重(zhong)新(xin)購置帶有(you)酶標(biao)板轉(zhuan)子(zi)的(de)離心機(ji)，不(bu)僅增(zeng)加(jia)了設備購置成本(ben)，而(er)且(qie)在(zai)使(shi)用(yong)過程中(zhong)更(geng)換(huan)轉(zhuan)子(zi)也(ye)較(jiao)為(wei)繁瑣(suo)。相比(bi)之(zhi)下(xia)，96 孔(kong)板真(zhen)空(kong)純(chun)化(hua)抽濾(lv)裝置(zhi)具(ju)有(you)很(hen)強的(de)兼(jian)容(rong)性(xing)。例如，壹些(xie)型(xing)號的裝置(zhi)既(ji)可以(yi)搭配(pei) 96 孔(kong)或 384 孔(kong)過濾(lv)板，也(ye)可以(yi)使用(yong)標(biao)配(pei)包(bao)含(han)的(de)離(li)心柱(zhu)放(fang)置板來(lai)處理(li)各(ge)種(zhong)容(rong)量的離(li)心過濾(lv)管(guan)，壹套(tao)設備就能滿(man)足(zu)多種(zhong)過(guo)濾(lv)需(xu)求，無(wu)需(xu)額外(wai)購買其他選(xuan)配(pei)件(jian)，有(you)效降(jiang)低(di)了設備購置和使(shi)用(yong)成本(ben)。

3.運(yun)行(xing)安(an)靜(jing)，振(zhen)動(dong)小：

        離(li)心機(ji)在(zai)運(yun)行(xing)過(guo)程中(zhong)，尤其是(shi)使(shi)用(yong)較高(gao)轉速(su)或者(zhe)制冷(leng)功(gong)能時(shi)，會(hui)產(chan)生較(jiao)大(da)的噪(zao)音(yin)和振(zhen)動(dong)，不(bu)僅(jin)會(hui)對(dui)操(cao)作(zuo)人(ren)員(yuan)的工作(zuo)環境造(zao)成(cheng)幹(gan)擾，長期處於這種(zhong)環境中(zhong)還(hai)可能影(ying)響(xiang)身(shen)體健(jian)康(kang)。而(er) 96 孔(kong)板真(zhen)空(kong)純(chun)化(hua)抽濾(lv)裝置(zhi)配(pei)置(zhi)的(de)無油真(zhen)空(kong)抽濾(lv)泵(beng)，噪(zao)音(yin)值(zhi)壹般(ban)較(jiao)低，R300抽濾(lv)泵(beng)噪(zao)音(yin)低(di)於50分(fen)唄(bei)，且(qie)工(gong)作(zuo)振(zhen)動(dong)很(hen)小，能夠為(wei)操(cao)作(zuo)人(ren)員(yuan)提供壹個(ge)相對安(an)靜、舒(shu)適(shi)的(de)使(shi)用(yong)環境。

        所(suo)以(yi)綜(zong)上(shang)，傳統(tong)離(li)心法(fa)過濾(lv)和96孔(kong)板真(zhen)空(kong)裝(zhuang)置(zhi)對(dui)比(bi)，主要有如(ru)下(xia)差(cha)異(yi)：

●時(shi)間成本(ben)懸(xuan)殊：傳統(tong)方(fang)法(fa)需(xu)手工(gong)分(fen)裝(zhuang)樣(yang)本(ben)、多(duo)次(ci)離(li)心置換(huan)廢液，處理(li)96個(ge)樣(yang)本(ben)常(chang)需(xu)數小時(shi)；而(er)真(zhen)空(kong)系(xi)統(tong)通(tong)過連(lian)續(xu)負壓(ya)抽濾(lv)，同步(bu)處理(li)所(suo)有樣(yang)本(ben)，如(ru)R3-W200-SB296孔(kong)板真(zhen)空(kong)抽濾(lv)裝置(zhi)可縮(suo)短70%以(yi)上(shang)操(cao)作(zuo)時(shi)間510。

●均壹性(xing)差(cha)異(yi)：離(li)心過程中(zhong)轉(zhuan)子(zi)加(jia)速(su)度(du)的(de)波動可能導(dao)致(zhi)孔(kong)間回收(shou)率偏(pian)差(cha)；真(zhen)空(kong)抽濾(lv)則對(dui)整板施(shi)加(jia)均勻壓(ya)力(li)，使(shi)孔(kong)間差(cha)異(yi)最(zui)小化(hua)，保障數據(ju)可靠性(xing)14。

●自(zi)動(dong)化(hua)潛力(li)：96孔(kong)板格式直(zhi)接(jie)匹(pi)配(pei)自(zi)動(dong)化(hua)工(gong)作(zuo)站(zhan)，配(pei)合(he)機(ji)械(xie)臂可實現無(wu)人值(zhi)守(shou)操(cao)作(zuo)，而(er)傳統(tong)離(li)心柱(zhu)需(xu)人工(gong)幹(gan)預29。