培(pei)養(yang)基廢(fei)液(ye)抽(chou)吸裝置滅(mie)菌和(he)防汙染(ran)的方(fang)法、註意事(shi)項介紹

       在(zai)細胞(bao)培(pei)養(yang)實(shi)驗(yan)中，培(pei)養(yang)基上清廢(fei)液(ye)真(zhen)空(kong)吸(xi)引裝置是(shi)重(zhong)要(yao)的工(gong)具。這(zhe)類(lei)裝置直(zhi)接接觸(chu)培(pei)養(yang)環(huan)境，其滅(mie)菌效(xiao)果(guo)直(zhi)接關(guan)系(xi)到(dao)細胞(bao)培(pei)養(yang)的(de)成(cheng)敗(bai)——沒有有效消(xiao)毒(du)可(ke)能(neng)引(yin)入(ru)微生(sheng)物(wu)汙染，導致(zhi)整(zheng)個實驗(yan)失(shi)敗(bai)，造(zao)成(cheng)時(shi)間與(yu)資源(yuan)上的重(zhong)大損失(shi)13。因此(ci)，建立科學(xue)、系(xi)統的(de)滅(mie)菌流(liu)程(cheng)至關(guan)重(zhong)要(yao)。

壹(yi)、培(pei)養(yang)基廢(fei)液(ye)抽(chou)吸泵日(ri)程(cheng)關(guan)鍵防汙染(ran)措施

1.高(gao)溫(wen)高(gao)壓滅(mie)菌：這(zhe)是(shi)最主(zhu)要(yao)和常(chang)見的方(fang)式(shi)，能(neng)夠(gou)有效殺滅(mie)細菌、真菌(jun)及(ji)其(qi)孢子。

2.防菌滯留(liu)：向(xiang)瓶(ping)內(nei)吸入少(shao)量(liang)稀釋(shi)消(xiao)毒(du)液(ye)，如0. 1%次氯(lv)酸(suan)鈉，廢(fei)液(ye)抽(chou)吸後，可(ke)抑(yi)制收(shou)集期內(nei)微生(sheng)物(wu)繁殖。

3.吸頭(tou)適配(pei)器與壹(yi)次性(xing)耗(hao)材：單(dan)道、8道吸(xi)頭(tou)適配(pei)器，每(mei)次使(shi)用(yong)後應(ying)滅(mie)菌，防止交(jiao)叉汙(wu)染。需要(yao)特別(bie)註意的是(shi)，吸(xi)頭(tou)適配(pei)器並(bing)非直(zhi)接用於(yu)吸液(ye)，壹(yi)般需要(yao)插上壹(yi)次性(xing)Tip槍(qiang)頭(tou)。

二(er)、裝置結(jie)構(gou)與(yu)分(fen)區滅(mie)菌策(ce)略

       在(zai)了(le)解(jie)上述常用的(de)防汙染(ran)措施後(hou)，我們(men)再(zai)來(lai)詳(xiang)細介紹設備(bei)不(bu)同(tong)組(zu)成(cheng)部(bu)分(fen)所對(dui)應(ying)的(de)不同(tong)消(xiao)毒(du)滅(mie)菌方(fang)法。由於(yu)廢(fei)液(ye)真(zhen)空(kong)吸(xi)引裝置通常由主(zhu)機機(ji)體(ti)與(yu)液(ye)體(ti)接觸(chu)附件（集液(ye)瓶(ping)、吸(xi)頭(tou)適配(pei)器、吸液(ye)管(guan)等(deng)）兩大部(bu)分(fen)構(gou)成(cheng)，不(bu)同(tong)部(bu)分(fen)的材(cai)質(zhi)、結(jie)構(gou)與(yu)功能(neng)差(cha)異(yi)決定了(le)滅(mie)菌方(fang)法的區別。

1. 主(zhu)機機(ji)體(ti)

       主(zhu)機雖然不(bu)直(zhi)接接觸(chu)培(pei)養(yang)液(ye)，但作為(wei)整(zheng)體(ti)系(xi)統的(de)壹(yi)部(bu)分(fen)，其表面(mian)消(xiao)毒(du)也(ye)很重(zhong)要(yao)，否則(ze)可能(neng)會(hui)影(ying)響(xiang)細胞(bao)房環境。常見(jian)的滅(mie)菌方(fang)式包(bao)括(kuo)：

1）75%酒精擦(ca)拭(shi)：實驗(yan)前後(hou)使(shi)用無(wu)菌(jun)布浸潤(run)酒精全面擦(ca)拭(shi)機體(ti)表面(mian)，尤其(qi)註(zhu)意按鈕、接口(kou)等(deng)易忽(hu)略部(bu)位。

2）紫外(wai)燈(deng)照(zhao)射：在(zai)細胞(bao)房整(zheng)體(ti)紫(zi)外(wai)消(xiao)毒(du)時(shi)，設備(bei)外(wai)殼(ke)可(ke)耐受紫外(wai)照(zhao)射，無(wu)老化(hua)褪(tui)色(se)風(feng)險(xian)。

         專門用(yong)於(yu)抽(chou)吸培(pei)養(yang)基上清廢(fei)液(ye)的(de)產(chan)品(pin)在(zai)設計(ji)時(shi)也(ye)會(hui)考(kao)慮到(dao)這(zhe)方(fang)面，如BSUD-S204P4A型(xing)號(hao)采(cai)用(yong)全(quan)不(bu)銹(xiu)鋼外(wai)殼(ke)，表面(mian)光(guang)滑，便於(yu)清潔(jie)和(he)滅(mie)菌，同(tong)時(shi)不銹(xiu)鋼材(cai)料長(chang)久(jiu)受紫(zi)外(wai)照(zhao)射也(ye)不會(hui)有所影響，普(pu)通塑料材質長(chang)期照(zhao)射易(yi)脆(cui)化(hua)開(kai)裂(lie)。再(zai)比(bi)如全(quan)新(xin)款(kuan)的BV300EP2實(shi)驗(yan)室2升(sheng)臺式吸液(ye)泵(beng)的(de)外(wai)殼(ke)為(wei)全(quan)密(mi)閉(bi)，正面沒有散(san)熱(re)孔(kong)，便於(yu)噴灑(sa)酒精。

2. 液(ye)體(ti)接觸(chu)附件（廢(fei)液(ye)瓶(ping)、管(guan)路及(ji)吸(xi)頭(tou)適配(pei)器）

        這(zhe)些(xie)部(bu)件(jian)直(zhi)接接觸(chu)廢(fei)液(ye)，是(shi)汙(wu)染(ran)防控(kong)的核心，需采(cai)用(yong)更(geng)強(qiang)效(xiao)的滅(mie)菌方(fang)式，主(zhu)要(yao)包括(kuo)：

1）高(gao)溫(wen)高(gao)壓滅(mie)菌法：

將廢(fei)液(ye)收(shou)集瓶(ping)（PP聚(ju)丙烯材(cai)質(zhi)）、泵管(guan)、手(shou)持操(cao)作器(qi)（POM聚(ju)甲醛(quan)材(cai)質）、吸(xi)頭(tou)適配(pei)器等(deng)拆卸後(hou)，置(zhi)於(yu)高(gao)壓滅(mie)菌鍋(guo)內(nei)121°C條件下(xia)滅(mie)菌30分(fen)鐘(zhong)，能(neng)殺(sha)滅(mie)細菌、真菌(jun)及(ji)其(qi)孢子。需要(yao)註意的是(shi)滅(mie)菌後(hou)必須(xu)烘幹，避(bi)免(mian)殘留(liu)水(shui)分(fen)被吸(xi)入(ru)主(zhu)機導致(zhi)設備(bei)損壞(huai)。

2）化(hua)學(xue)消(xiao)毒(du)液(ye)浸(jin)泡法：

日常連(lian)續使(shi)用期間，無(wu)法每(mei)次抽(chou)取(qu)後(hou)立(li)即高(gao)壓滅(mie)菌。推(tui)薦使(shi)用(yong)含(han)氯消(xiao)毒(du)液(ye)，如次氯(lv)酸(suan)鈉適當(dang)稀釋(shi)液(ye)，能(neng)有效抑(yi)制瓶(ping)內(nei)及管(guan)路中微生(sheng)物(wu)滋生。這(zhe)裏需要(yao)註意的是(shi)消(xiao)毒(du)液(ye)浸(jin)泡後(hou)必(bi)須用(yong)清水沖洗，避(bi)免(mian)化(hua)學(xue)殘留(liu)腐(fu)蝕(shi)部(bu)件(jian)或(huo)影響(xiang)後(hou)續(xu)細胞(bao)操(cao)作。此(ci)外(wai)廢(fei)液(ye)瓶(ping)材(cai)質需要(yao)能(neng)夠(gou)耐受含氯的(de)消(xiao)毒(du)液(ye)，如使(shi)用(yong)PP聚(ju)丙烯材(cai)質(zhi)制作廢(fei)液(ye)瓶(ping)的(de)BV300AP2和聚碸(feng)類材(cai)質(zhi)制作廢(fei)液(ye)瓶(ping)的(de)BV300EP，都可以(yi)使用(yong)這(zhe)種(zhong)防止長(chang)菌的方(fang)法。

三(san)、操(cao)作流(liu)程(cheng)規(gui)範與(yu)常見(jian)錯誤(wu)規(gui)避(bi)

為(wei)確(que)保(bao)滅(mie)菌有效且設(she)備(bei)安(an)全(quan)，需建(jian)立(li)嚴格(ge)的操(cao)作規(gui)範，下(xia)面(mian)是壹(yi)些常見的註(zhu)意事(shi)項：

●滅(mie)菌後(hou)組(zu)裝：部(bu)件(jian)烘幹(gan)後再連(lian)接，濕態(tai)組(zu)裝導致(zhi)主(zhu)機電(dian)路(lu)短(duan)路。

●廢(fei)液(ye)處(chu)理(li)：121°C高(gao)壓滅(mie)菌30分(fen)鐘(zhong)再丟(diu)棄(qi)，直(zhi)接傾(qing)倒(dao)汙(wu)染(ran)環(huan)境。

●管(guan)路清潔(jie)：如使(shi)用(yong)次氯(lv)酸(suan)鈉浸(jin)泡，滅(mie)菌前，需要(yao)用清水充分(fen)沖洗各部(bu)件(jian)，消(xiao)毒(du)液(ye)殘留(liu)腐(fu)蝕(shi)部(bu)件(jian)。

●設備(bei)存(cun)放：置(zhi)於(yu)潔(jie)凈(jing)、幹(gan)燥(zao)環境，有條件的可(ke)以(yi)遮(zhe)蓋防塵，隨(sui)意放置(zhi)致(zhi)二(er)次汙(wu)染(ran)。

●避(bi)免(mian)使(shi)用非實驗(yan)室專用(yong)的(de)吸(xi)液(ye)設(she)備(bei)，如醫(yi)用(yong)或(huo)民用(yong)吸(xi)液(ye)裝置，其(qi)材(cai)質可能(neng)無(wu)法耐受高(gao)溫(wen)高(gao)壓或(huo)消(xiao)毒(du)液(ye)。

●除不(bu)銹(xiu)鋼和(he)鋁(lv)合(he)金(jin)機(ji)體(ti)型(xing)號(hao)外(wai)，紫(zi)外(wai)消(xiao)毒(du)時(shi)主(zhu)機需暴露(lu)於(yu)照(zhao)射範(fan)圍(wei)，勿(wu)用(yong)普通塑料罩覆(fu)蓋。

四、總(zong)結(jie)

培(pei)養(yang)基廢(fei)液(ye)吸(xi)取(qu)裝置的(de)滅(mie)菌管(guan)理是(shi)壹(yi)項系(xi)統性(xing)工(gong)程(cheng)，需結(jie)合(he)設(she)備(bei)材(cai)質(zhi)特性、使用(yong)頻率(lv)及(ji)實(shi)驗(yan)室條(tiao)件，綜合(he)運(yun)用(yong)物(wu)理滅(mie)菌（高(gao)溫(wen)高(gao)壓、紫外(wai)）與(yu)化(hua)學(xue)消(xiao)毒(du)（酒精、含氯制劑(ji)）手(shou)段(duan)。尤其(qi)重(zhong)視直(zhi)接接觸(chu)廢(fei)液(ye)的(de)附(fu)件(jian)滅(mie)菌，並(bing)養成(cheng)“操(cao)作前檢(jian)查(zha)，操(cao)作中防護，操(cao)作後(hou)處(chu)理"的習(xi)慣。唯有將嚴謹的滅(mie)菌程(cheng)序內(nei)化(hua)為(wei)實驗(yan)規(gui)範，才(cai)能(neng)為(wei)細胞(bao)培(pei)養(yang)築(zhu)起可靠的“無(wu)菌(jun)防線"，確(que)保(bao)科研(yan)結(jie)果(guo)的準確(que)性(xing)與可重(zhong)復性(xing)。