細(xi)胞培(pei)養(yang)基除菌(jun)過(guo)濾(lv)和(he)上(shang)清廢液(ye)抽(chou)吸(xi)兩用真(zhen)空系統的(de)用途和(he)使(shi)用方法(fa)介紹

培(pei)養(yang)基除菌(jun)過(guo)濾(lv)和(he)上(shang)清廢液(ye)抽(chou)吸(xi)兩項操作是(shi)細(xi)胞培(pei)養(yang)中不可少的(de)兩個環(huan)節，壹個在實驗(yan)前期準(zhun)備(bei)，另壹個則是(shi)後期(qi)處理。培養(yang)基除菌(jun)過(guo)濾(lv)是(shi)壹種物理除菌(jun)方法(fa)，利用(yong)微孔濾(lv)膜(mo)，通常(chang)孔(kong)徑(jing)為(wei)0.22µm，將(jiang)配置(zhi)好的(de)液(ye)體培(pei)養(yang)基中的(de)細(xi)菌(jun)、真(zhen)菌(jun)等(deng)微生物(wu)截(jie)留(liu)，從而(er)獲得(de)無菌(jun)溶液(ye)的(de)過程。這(zhe)是(shi)壹種在不破壞熱(re)敏感(gan)成分的(de)前提(ti)下，實現(xian)培養(yang)基或試(shi)劑的(de)無菌(jun)化(hua)的(de)方法(fa)。高壓(ya)蒸(zheng)汽滅菌(jun)會破壞培(pei)養(yang)基中的(de)維(wei)生素(su)、生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)、激(ji)素(su)等(deng)活性成分，因此除菌(jun)過(guo)濾(lv)是(shi)制備(bei)培(pei)養(yang)基的(de)標準(zhun)方法(fa)。而培(pei)養(yang)基上(shang)清廢液(ye)抽(chou)吸(xi)是(shi)指在(zai)細(xi)胞培(pei)養(yang)過程中，移除培養(yang)容器（如(ru)培養(yang)皿、培養(yang)瓶、孔(kong)板(ban)）中舊的(de)、已耗(hao)盡的(de)培養(yang)基、細(xi)胞代謝(xie)廢(fei)物(wu)或(huo)實驗(yan)處理液(ye)的(de)操作(zuo)。為(wei)細(xi)胞更(geng)換(huan)新(xin)鮮培(pei)養(yang)基、進(jin)行(xing)洗(xi)滌步驟（如(ru)PBS清洗）或(huo)收取特定組(zu)分（如(ru)上(shang)清、細(xi)胞）做(zuo)準(zhun)備。是(shi)維(wei)持細(xi)胞健康(kang)、進(jin)行(xing)實驗(yan)幹預的(de)常(chang)規(gui)操作(zuo)。

在(zai)許(xu)多(duo)實驗(yan)室中，為了進(jin)行(xing)這(zhe)兩項操作，往往需(xu)要準(zhun)備兩套不同設(she)備(bei)分別(bie)進(jin)行(xing)這(zhe)兩項操作，這(zhe)樣會增(zeng)加(jia)設(she)備(bei)購置(zhi)個管理成本。在(zai)具體(ti)操作(zuo)時(shi)，無論是(shi)除菌(jun)過(guo)濾(lv)還是(shi)上(shang)清廢液(ye)抽(chou)吸(xi)，其(qi)本質(zhi)都是(shi)利用(yong)真(zhen)空(kong)泵(beng)產生的(de)負壓(ya)吸(xi)引(yin)力。區(qu)別(bie)在於，除菌(jun)過(guo)濾(lv)是(shi)通過(guo)負(fu)壓(ya)（真(zhen)空(kong)泵(beng)）或(huo)正壓(ya)（註射(she)器推(tui)註、蠕(ru)動泵(beng)）驅(qu)動液(ye)體通過(guo)濾(lv)膜，壹般實驗(yan)室由(you)於(yu)過濾量不多(duo)，常(chang)用(yong)的(de)是(shi)連接(jie)真(zhen)空(kong)泵(beng)的(de)負壓(ya)抽(chou)濾(lv)裝置(zhi)；而上(shang)清廢液(ye)抽(chou)吸(xi)則(ze)是(shi)將吸(xi)頭(tou)置(zhi)於液(ye)面處或(huo)緊(jin)貼(tie)容器側(ce)壁(bi)底部(bu)，利(li)用負(fu)壓(ya)緩(huan)慢吸(xi)走(zou)液(ye)體。對於貼壁(bi)細(xi)胞，可(ke)稍(shao)微傾(qing)斜容器，使液(ye)體集(ji)中在壹角後再(zai)抽(chou)吸(xi)。所(suo)以(yi)通過(guo)精(jing)巧(qiao)的(de)設(she)計，可(ke)實現(xian)使用(yong)壹臺(tai)負(fu)壓(ya)真(zhen)空(kong)系統，同時實現(xian)這(zhe)兩項操作，比(bi)如(ru)聖斯(si)特的(de)L100SAF培養(yang)基除菌(jun)過(guo)濾(lv)和(he)上(shang)清廢液(ye)抽(chou)吸(xi)兩用真(zhen)空系統，下面我(wo)們(men)來介紹具(ju)體(ti)操作使用(yong)，幫(bang)助客戶進(jin)壹步了解此類設(she)備(bei)。

●除菌(jun)過(guo)濾(lv)的(de)操作(zuo)：

1.取(qu)出47或50 mm的(de)濾膜(mo)放到過濾(lv)轉接(jie)座(zuo)濾(lv)膜(mo)支(zhi)撐片上(shang)，註意使其(qi)位(wei)於支(zhi)撐片中間(jian)。

2.將過濾(lv)杯(bei)放置(zhi)於濾膜(mo)的(de)上(shang)方，再以(yi)順(shun)時針方向輕(qing)輕(qing)的(de)旋(xuan)緊(jin)，讓(rang)過(guo)濾杯(bei)卡住(zhu)過(guo)濾基座(zuo)。

3.主(zhu)機機體請(qing)使(shi)用(yong)75%的(de)酒精(jing)擦(ca)拭(shi)消毒(du)滅菌(jun)；過(guo)濾(lv)器、藍蓋(gai)試(shi)劑瓶和(he)泵(beng)管(guan)請(qing)使(shi)用(yong)121度(du)高溫(wen)高(gao)壓(ya)濕熱(re)滅菌(jun)，不(bu)可(ke)以(yi)使(shi)用消毒劑、有(you)機溶劑或(huo)者(zhe)其他(ta)清潔劑浸(jin)泡(pao)、清洗，會造(zao)成部(bu)件(jian)的(de)腐蝕(shi)開裂(lie)。

4.如(ru)果使(shi)用的(de)是(shi)普通濾(lv)膜(mo)，建議(yi)裝(zhuang)入瓶頂(ding)式真空(kong)過(guo)濾(lv)器後再(zai)壹起滅菌(jun)；如(ru)果使(shi)用的(de)是(shi)已滅菌(jun)無菌(jun)包(bao)裝(zhuang)的(de)濾膜(mo)，可(ke)以(yi)在(zai)過濾器滅菌(jun)後再(zai)裝入。

5.將過濾(lv)連(lian)接(jie)座(zuo)接(jie)到GL45標準(zhun)螺(luo)紋口(kou)玻(bo)璃試(shi)劑瓶上(shang)，順時針(zhen)方向旋(xuan)緊(jin)。

6.將(jiang)真(zhen)空過濾瓶插(cha)入放置(zhi)槽內，用(yong)泵(beng)管(guan)連(lian)接(jie)阻水(shui)保護器和(he)過(guo)濾連接(jie)座(zuo)側(ce)邊(bian)泵(beng)管(guan)接(jie)口(kou)。

7.將(jiang)要液(ye)體倒入過濾杯(bei)中，過濾過程中需(xu)要接(jie)觸的(de)空氣(qi)是(shi)幹凈(jing)無菌(jun)的(de)，請(qing)在(zai)漏(lou)鬥(dou)蓋上(shang)插上(shang)0.2 µm的(de)過濾(lv)器，並將漏(lou)鬥蓋(gai)蓋(gai)到過濾(lv)杯(bei)上(shang)，是(shi)空氣(qi)通過(guo)濾(lv)器再推(tui)動濾液(ye)。

8.用泵(beng)管(guan)連(lian)接(jie)抽(chou)濾(lv)泵(beng)和(he)過(guo)濾基座(zuo)接(jie)口(kou)，啟(qi)動主機開始過(guo)濾，過(guo)濾完(wan)後將(jiang)關機。

9.將過濾杯(bei)從轉接(jie)過(guo)濾(lv)座(zuo)上(shang)以(yi)反(fan)時針(zhen)方向旋(xuan)開，請(qing)依實驗(yan)程序(xu)進(jin)壹步處理濾膜(mo)。

10.再依實驗(yan)程序(xu)進(jin)行(xing)收(shou)集，分析或處(chu)理瓶內(nei)的(de)溶液(ye)。

11.完(wan)成過濾後，請(qing)將(jiang)過(guo)濾(lv)器以(yi)清水沖(chong)幹凈(jing)，擦(ca)幹後保(bao)存(cun)。

●真(zhen)空(kong)集液(ye)瓶的(de)鏈(lian)接(jie)和(he)操(cao)作：

1.將導(dao)流延長管(guan)接(jie)在(zai)兩孔吸(xi)液(ye)蓋內(nei)側(ce)，並按照螺紋的(de)方向擰在試(shi)劑瓶上(shang)，組(zu)成完(wan)整(zheng)的(de)真空(kong)吸(xi)液(ye)瓶，組(zu)合(he)完(wan)成將吸(xi)液(ye)瓶插(cha)入主機的(de)放置(zhi)槽內。

2.連(lian)接(jie)真(zhen)空(kong)泵(beng)管(guan)和(he)吸(xi)液(ye)管：取(qu)出真空(kong)泵(beng)管(guan)連(lian)接(jie)阻水(shui)保護器和(he)兩孔吸(xi)液(ye)蓋的(de)吸(xi)氣(qi)端（AIR）；取(qu)出吸(xi)液(ye)管（2米(mi)長(chang)壹根）連結手持操(cao)作(zuo)器和(he)兩孔吸(xi)液(ye)蓋的(de)液(ye)體端(duan)（LIQ）。

3.完(wan)成吸(xi)液(ye)瓶的(de)組(zu)裝後，可(ke)以(yi)參(can)看下壹章(zhang)節“吸(xi)液(ye)套件(jian)組(zu)的(de)連接(jie)和(he)操(cao)作使用(yong)"，完(wan)成吸(xi)液(ye)套件(jian)的(de)連接(jie)。

4.開機開始吸(xi)液(ye)，可以(yi)參(can)看下壹章(zhang)節“吸(xi)液(ye)套件(jian)組(zu)的(de)連接(jie)和(he)操(cao)作使用(yong)"，使用對應的(de)吸(xi)頭(tou)適配器來吸(xi)液(ye)。。

5.註意觀察(cha)廢(fei)液(ye)瓶的(de)液(ye)位(wei)，液(ye)位(wei)過高(gao)時(shi)應(ying)停止吸(xi)液(ye)，以(yi)免液(ye)體倒吸(xi)入泵(beng)。